凍干樣品的保存期與樣品的含水量也就是水分含量有顯著的關系,，含水量越高，反應越劇烈,，保存期越短,，越容易發(fā)生變性，水解氧化等各種反應,。因此控制凍干樣品的含水量非常關鍵,，測定含水量是嚴重我們凍干工藝的一個重要手段。測試含水量的方法有：費休氏法,、加熱失重法,、減壓干燥法等。其中基于費休氏法的方法包括容量滴定法和庫倫滴定法,。IVD凍干樣品由于樣品含量比較少,，大部分都是微升級別，適合費休氏法,。制藥行業(yè)凍干樣品測量含水量相對精準也是采用此法,。

引用藥典中的容量滴定法。

　　 本法是根據(jù)碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中與水定量反應的原理來測定水分,。所用儀器應干燥,，并能避免空氣中水分的侵入；測定應在干燥處進行,。

　　  費休氏試液的制備與標定

　?。?/span>1）制備　稱取碘（置硫酸干燥器內(nèi)48小時以上）110g，置干燥的具塞錐形瓶（或燒瓶）中,，加無水吡啶160ml，注意冷卻,，振搖至碘全部溶解,，加無水甲醇300ml，稱定重量,，將錐形瓶（或燒瓶）置冰浴中冷卻,，在避免空氣中水分侵入的條件下，通入干燥的二氧化硫至重量增加72g,，再加無水甲醇使成1000ml,，密塞，搖勻,，在暗處放置24小時,。

　　也可以使用穩(wěn)定的市售費休氏試液,。市售的費休氏試液可以是不含吡啶的其他堿化試劑，或不含甲醇的其他伯醇類等制成,；也可以是單一的溶液或由兩種溶液臨用前混合而成,。

　　本試液應遮光，密封,，陰涼干燥處保存,。臨用前應標定滴定度。

　?。?/span>2）標定　精密稱取純化水10～30mg,，用水分測定儀直接標定；或精密稱取純化水10～30mg,，置干燥的具塞錐形瓶中,，除另有規(guī)定外，加無水甲醇適量,，在避免空氣中水分侵入的條件下,，用費休氏試液滴定至溶液由淺黃色變?yōu)榧t棕色，或用電化學方法［如永停滴定法（通則0701）等］指示終點,；另做空白試驗,，按下式計算：

　　F=W/(A-B)

　　式中　F為每1ml費休氏試液相當于水的重量，mg,；

　　　　　W為稱取純化水的重量,，mg；

　　　　　A為滴定所消耗費休氏試液的容積,，ml,；

　　　　　B為空白所消耗費休氏試液的容積，ml,。

　　測定法　精密稱取供試品適量（約消耗費休氏試液1～5ml）,，除另有規(guī)定外，溶劑為無水甲醇,，用水分測定儀直接測定,。或精密稱取供試品適量,，置干燥的具塞錐形瓶中,，加溶劑適量，在不斷振搖（或攪拌）下用費休氏試液滴定至溶液由淺黃色變?yōu)榧t棕色,，或用永停滴定法（通則0701）指示終點,；另做空白試驗，按下式計算：

　　供試品水分含量（%）=（A-B)*F/W*100%

　　式中　A為供試品所消耗費休氏試液的體積,，ml,；

　　　　　B為空白所消耗費休氏試液的體積,，ml；

　　　　　F為每1ml費休氏試液相當于水的重量,，mg,；

　　　　　W為供試品的重量，mg,。

　　如供試品吸濕性較強,，可稱取供試品適量置干燥的容器中，密封（可在干燥的隔離箱中操作）,，精密稱定,，用干燥的注射器注入適量無水甲醇或其他適宜溶劑，精密稱定總重量,，振搖使供試品溶解,，測定該溶液水分。洗凈并烘干容器,，精密稱定其重量,。同時測定溶劑的水分。按下式計算：

　　供試品水分含量（%）=[(W1-W3)c1-(W1-W2)c₂]/(W2-W3)*100%

　　式中　W₁為供試品,、溶劑和容器的重量,，g；

　　　　　W₂為供試品,、容器的重量,，g；

　　　　　W₃為容器的重量,，g,；

　　　　　c₁為供試品溶液的水分含量，g/g,；

　　　　　c₂為溶劑的水分含量,，g/g。

　　對熱穩(wěn)定的供試品,，亦可將水分測定儀和市售卡氏干燥爐聯(lián)用測定水分,。即將一定量的供試品在干燥爐或樣品瓶中加熱，并用干燥氣體將蒸發(fā)出的水分導入水分測定儀中測定,。